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| 產(chǎn)地 | 美國StemRD |
| 品牌 | 美國StemRD公司 |
| 貨號(hào) | MGro-500 |
| 保存條件 | -10～-20℃ |
| 英文名稱 | MGro-500 Chemically Defined MSC Medium |
| 保質(zhì)期 | 2年個(gè)月 |
StemRD Mgro-500 MesenGro 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基
StemRD Mgro-500 MesenGro 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基
StemRD Mgro-500 MesenGro 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基
英文名稱： MGro-500 Chemically Defined MSC Medium
產(chǎn)品應(yīng)用： 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)
中國俗稱： 間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 中國簡稱： 干細(xì)胞培養(yǎng)基
注冊品牌： StemRD 生產(chǎn)廠家： 美國StemRD公司
訂購貨號(hào)： MGro-500B
規(guī)格型號(hào)： 500mL
保存溫度： 2～8 ℃, -80 ℃
產(chǎn)品種類： 無血清細(xì)胞培養(yǎng)基
到貨時(shí)間： 上海倉庫有現(xiàn)貨，1～3天到貨
產(chǎn)品編碼： YS000640
產(chǎn)品英文名稱：MGro-500 Chemically Defined MSC Medium
產(chǎn)品中文名稱：500 ml人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基
MGro-500 Chemically Defined MSC Medium 產(chǎn)品信息
Human mesenchymal stem cells (hMSCs) hold promise for the treatment of a wide variety of diseases. Currently, fetal bovine serum (FBS) is added to the medium to achieve expansion of hMSCs. However, concerns have been raised over animal-born pathogens, immune reactions and lot-to-lot variations caused by the undefined nature of FBS. To address these issues, StemRD has developed MesenGro®, a chemically-defined, serum-free and xeno-free medium for the expansion of hMSCs.
The MesenGro Chemically Defined MSC Medium (for simplicity, referred to as “MesenGro” in this document) has been designed for the maximum expansion of human mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow, cord blood, or adipose tissue.MesenGro is chemically defined as its components are either chemically synthesized, recombinantly produced and purified. It can be considered xeno-free as none of its ingredients are directly derived from non-human animals. MesenGro further offers the convenience of no plate-coating if used with certain tissue culture vessels (see below), saving cost of coating materials and time needed for coating.
MGro-500人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的組成
MesenGro Basal Medium, 1 x 450mL
MesenGro Supplement, 1 x 50mL
MGro-500 Chemically Defined MSC Medium的保存條件
MesenGro Basal Medium: 2 to 8°C
MesenGro Supplement : -80°
MesenGro-500人類間充質(zhì)干細(xì)胞無清培養(yǎng)基 產(chǎn)品特性
? 無血清 Serum-Free
? 無異種蛋白 Xeno-Free
? 化學(xué)成分明確 Chemically-Defined
? 無需昂貴的鋪板蛋白 No Plate Coating Necessary
? 生長分化優(yōu)于血清培養(yǎng)基 Perform Better than FBS Medium
MesenGro Chemically Defined MSC MediumDescription產(chǎn)品英文簡述
The MesenGro® Chemically Defined MSC Medium (for simplicity, referred to as “MesenGro”) has been designed for the maximum expansion of human mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow, cord blood, or adipose tissue. MesenGro® is chemically defined as its components are either chemically synthesized, recombinantly produced and purified. It can be considered xeno-free as none of its ingredients are directly derived from non-human animals. MesenGro® further offers the convenience of no plate-coating if used with certain tissue culture vessels (see below), saving cost of coating materials and time needed for coating.
額外的關(guān)鍵試劑要求或建議
沒有plate-coating:康寧CellBIND®組織培養(yǎng)的玻璃瓶(如。 ,25厘米 2 組織培養(yǎng)的玻璃瓶,康寧貓# 3289)
plate-coating:纖連蛋白(StemRD貓# Fibro-10或等效)和常規(guī)TC-treated組織培養(yǎng)的玻璃瓶
TrypLE ™ 表達(dá)(GIBCO # 12604),或0.05%胰蛋白酶/ 0.53毫米EDTA(例如Mediatech # 25 - 051 - ci),或同等學(xué)歷
改編的msc之前在其他媒體培養(yǎng):
細(xì)胞培養(yǎng)在血清或血清媒體可以快速、輕松地改編成MesenGro。 在大多數(shù)情況下,一個(gè)
一步進(jìn)入MesenGro完全培養(yǎng)基就足夠了。 如果是這樣,步進(jìn)式適應(yīng)逐漸增加
的MesenGro(如20%、40%等)也可以被執(zhí)行。
人類細(xì)胞凍存復(fù)蘇:
凍人msc、不管什么介質(zhì)用于種植或凍結(jié)之前,可以很容易地和迅速適應(yīng)
MesenGro。 一步過渡到MesenGro介質(zhì)如下面所列通常是足夠的細(xì)胞
在媒體血清或血清生長和冷凍。
1。 迅速解凍冷凍瓶細(xì)胞37°C水浴。
2。 細(xì)胞轉(zhuǎn)移到50毫升錐形管。
3。 每1毫升的細(xì)胞懸液,添加10毫升的預(yù)熱(37°C)MesenGro drop-wise方式完全培養(yǎng)基
同時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)管。
4。 板錐形管的內(nèi)容到一個(gè)組織培養(yǎng)瓶或多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)板的井。 另外,細(xì)胞
也可以離心機(jī)在250 x g(~ 1200 rpm)10分鐘,在MesenGro resuspended完全培養(yǎng)基,然后鍍。
5。 孵化在36 - 38°C調(diào)濕大氣二氧化碳包含4到6%。
6。 24小時(shí)后,拋棄舊與新媒體媒介和飼料細(xì)胞。
7。 維護(hù)文化通過改變介質(zhì)每2天,直到細(xì)胞通道
通過msc MesenGro:
涂層的細(xì)胞培養(yǎng)器皿MesenGro時(shí)沒有必要使用特定的組織培養(yǎng)器皿,例如,
康寧CellBIND®組織文化產(chǎn)品或BD PrimariaTM組織文化產(chǎn)品(25厘米2組織培養(yǎng)的玻璃瓶,BD貓# 353808)。 其他品牌和型號(hào)的組織文化船只目前正在評(píng)估。 組織文化
沒有評(píng)估血管或發(fā)現(xiàn)不兼容no-coating程序,我們建議
涂層與纖連蛋白(StemRD貓# Fibro-10)為0.5 - 1微克/厘米 2 面積為1小時(shí)37°C,緊隨其后
電鍍MesenGro細(xì)胞。
1。 視覺檢查股票文化(生長在MesenGro或其他介質(zhì)配方)在顯微鏡下并確認(rèn)細(xì)胞準(zhǔn)備sub-passaged。 保持*增長潛力的msc、建議的細(xì)胞是通過confluency時(shí)達(dá)到70%。 如果MSC confluency文化是允許達(dá)到80%或更高,他們可能通過后停止增殖。 因此,它是至關(guān)重要的不是CONFLENCY細(xì)胞增長超過80% 在任何情況下!
2。 預(yù)熱TrypLE™表達(dá)(或0.05%胰蛋白酶/ 0.53毫米EDTA)和MesenGro完全培養(yǎng)基在使用前37°C。
3。 刪除了(舊)從瓶中使用一個(gè)吸管和丟棄。
4。 可選:洗組織培養(yǎng)與DPBS表面,刪除和丟棄。
5。 添加TrypLE™表達(dá)(或0.05%胰蛋白酶/ 0.53毫米EDTA)瓶,瓶傾斜涵蓋所有細(xì)胞。 我們建議
在室溫下分離的細(xì)胞。
個(gè)人的6-well板(~ 10厘米 2 ) T25瓶(25厘米 2 )
TrypLE表達(dá)量或胰蛋白酶 0.5毫升 1毫升
6。 在顯微鏡下觀察細(xì)胞。 當(dāng)細(xì)胞開始分離,輕敲船的一邊來幫助放松
剩余的細(xì)胞。 細(xì)胞分離所需的時(shí)間應(yīng)該是1 - 3分鐘,如果在MesenGro培養(yǎng)細(xì)胞。 細(xì)胞生長在血清媒體需要孵化時(shí)間分離。
一旦所有的細(xì)胞分離,迅速進(jìn)行下面的步驟。 不要離開細(xì)胞TrypLE™明示或胰蛋白酶
一段時(shí)間的細(xì)胞分離后,因?yàn)檫@將影響細(xì)胞的生長。
7。 在細(xì)胞分離、添加MesenGro胰蛋白酶溶液的體積兩倍使用(例如2毫升T25瓶)。 收集
細(xì)胞懸液的無菌15毫升錐形管。
可選:如果0.05%胰蛋白酶/ EDTA溶液用于分離細(xì)胞,使用大豆胰蛋白酶抑制劑是可取的
中和胰蛋白酶。 這一點(diǎn)尤其必要的清洗步驟(步驟8)如果不能迅速處理(在10分鐘)。
(這是由于血清等媒體配方MesenGro不包含抗胰蛋白酶,組件發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物
血清。 除非迅速消除離心,胰蛋白酶能破壞細(xì)胞并影響經(jīng)濟(jì)增長。 如果TrypLE
使用快遞
分離的細(xì)胞,那么沒有必要中和它根據(jù)其生產(chǎn)。
8。 在1200轉(zhuǎn)離心細(xì)胞(250 x g)10分鐘。
9。 追求和去除盡可能多的上清。 Resuspend細(xì)胞預(yù)熱MesenGro完全培養(yǎng)基。 采取
細(xì)胞數(shù)的整除的細(xì)胞懸液。
10。 將細(xì)胞放入組織培養(yǎng)血管的密度5 x10 3 細(xì)胞/平方厘米。 傾斜的船幾次,以確保均勻分布的細(xì)胞懸液。
11。 孵化在37°C在濕潤的氣氛中4 - 6%的二氧化碳。
12。 每2天更換培養(yǎng)基與新鮮,預(yù)熱MesenGro完全培養(yǎng)基。
13。 通過細(xì)胞時(shí),細(xì)胞confluency達(dá)到80%(通常每隔3天)。
在MesenGro細(xì)胞冷凍保存
1。 準(zhǔn)備冷凍保存解決方案,補(bǔ)充MesenGro基礎(chǔ)培養(yǎng)基MesenGro補(bǔ)充為10%和10%
二甲亞砜(DMSO)。
2。 顆粒細(xì)胞,離心,resuspend細(xì)胞冷凍保存方案1.0 x10 6
細(xì)胞/毫升,cryovials轉(zhuǎn)移。
3。 地方cryovials在冷凍容器(例如耐5100 - 0001)和在-80°C冰箱過夜。
4。 轉(zhuǎn)移cryovials為長期儲(chǔ)存液態(tài)氮。
介質(zhì)制備
1。 解凍MesenGro補(bǔ)充。 建議解凍一夜之間在2 - 8°C。 解凍可以整除和材料
儲(chǔ)存在-80°C,但進(jìn)一步凍融周期應(yīng)該避免。
2。 讓100毫升MesenGro完全培養(yǎng)基,無菌添加10毫升MesenGro補(bǔ)充90毫升MesenGro基底
媒介。
3。 抗生素如Pen-Strep解決方案也可以被添加到完全培養(yǎng)基(如果需要的話)。 我們建議*
100單位/毫升濃度的青霉素和鏈霉素100微克/毫升。
曾經(jīng),MesenGro完全培養(yǎng)基(基底,補(bǔ)充和谷酰胺)是穩(wěn)定的1月當(dāng)存儲(chǔ)在黑暗中
在2 - 8°C。
