產(chǎn)地 | / |
品牌 | Takara |
貨號(hào) | Y30021 |
用途 | 人 iPS細(xì)胞基因編輯和單細(xì)胞克隆 |
包裝規(guī)格 | 1kit/盒 |
產(chǎn)品名稱:CellArtis Y30021 人 iPS細(xì)胞基因編輯和單細(xì)胞克隆系統(tǒng)
產(chǎn)品貨號(hào):CellArtis Y30021
產(chǎn)品品牌:TAKARA/ CellArtis
英文名稱:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
人 iPS細(xì)胞基因編輯和單細(xì)胞克隆系統(tǒng) 現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢
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從開始到結(jié)束:人iPS細(xì)胞基因編輯和單細(xì)胞克隆系統(tǒng)
人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(Human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)是一個(gè)功能強(qiáng)大的研究工具和疾病模型,因?yàn)槠渚邆湓鲋场⒆晕腋?、分化為多種細(xì)胞類型的能力。此外,人iPS細(xì)胞還可以再現(xiàn)細(xì)胞來源個(gè)體的疾病表型和基因型。將人iPS細(xì)胞結(jié)合基于CRISPR/Cas9的基因編輯技術(shù),可以在同基因的細(xì)胞系中研究特定基因改變引起的功能影響,因?yàn)榛蚓庉嬤^的人iPS細(xì)胞能提供可再生的、無遺傳變異的患病細(xì)胞和健康細(xì)胞資源。
CRISPR/Cas9系統(tǒng)已經(jīng)成為一個(gè)強(qiáng)大的基因編輯工具,因?yàn)槠涓叩陌邢蛱禺愋?,編輯效率和易用性。該技術(shù)的強(qiáng)大主要源于它的簡(jiǎn)單,因?yàn)槿恐恍枰粋€(gè)Cas9核酸酶結(jié)合一個(gè)單鏈向?qū)NA(single guide RNA,sgRNA) 就可以決定靶向特異性(Jinek et al. 2012)。這種RNA編程的(RNA-programmable)方法利用了非同源末端連接(non-homologous end joining,NHEJ) DNA修復(fù)途徑的易錯(cuò)特性,進(jìn)而產(chǎn)生基因敲除(通過插入/刪除)。這種方法也可以通過同源重組(homology-directed repair,HDR)途徑被用于基因敲入。
CRISPR/Cas9系統(tǒng)的組件可以通過多種方法成功導(dǎo)入至靶細(xì)胞,包括基于載體的表達(dá)系統(tǒng),RNA轉(zhuǎn)染, 導(dǎo)入Cas9/sgRNA核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)復(fù)合物(Sander and Joung 2014)等。與基于載體的方法相比,直接導(dǎo)入Cas9/sgRNA RNPs提供了一種快速轉(zhuǎn)入基因編輯實(shí)驗(yàn)的方法,同時(shí)脫靶效應(yīng)的可能性更?。↘im et al. 2014)。
一旦Cas9/sgRNA RNP復(fù)合物被導(dǎo)入,為了分離和篩選感興趣的基因型,單細(xì)胞必須被分離并擴(kuò)增為克隆細(xì)胞系。傳統(tǒng)上,從基因編輯的hiPS細(xì)胞建立一個(gè)克隆群是低效的、具有挑戰(zhàn)性的和耗時(shí)的,因?yàn)閔iPS 細(xì)胞是以集落生長(zhǎng)和傳代的。通常,這會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡和提前分化。然而,Cellartis單細(xì)胞克隆系統(tǒng)包含一個(gè)成分確定的培養(yǎng)系統(tǒng)(由基礎(chǔ)培養(yǎng)基,包被劑,和添加劑組成),用于有效形成單細(xì)胞克隆和擴(kuò)增基因編輯后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一個(gè)基于單層培養(yǎng)的系統(tǒng),規(guī)避了集落狀培養(yǎng)帶來的挑戰(zhàn),允許單細(xì)胞傳代和促進(jìn)接種的單細(xì)胞存活和后續(xù)擴(kuò)增。
Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一個(gè)完整的,在無飼養(yǎng)層和成分確定條件下,用于hiPSCs有效擴(kuò)增和擴(kuò)大生產(chǎn)的系統(tǒng)。試劑盒包含了從接種單細(xì)胞至96孔板到擴(kuò)增至48孔板過程中所有必要的試劑。單細(xì)胞克隆擴(kuò)增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xù)培養(yǎng)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.成分確定的,無血清,無飼養(yǎng)層培養(yǎng)
2.All-In-One型: 培養(yǎng)基+添加劑+包被劑維持良好的多能性狀態(tài),背景分化低
3.細(xì)胞非集落狀均勻生長(zhǎng),輕松單細(xì)胞傳代
4.單個(gè)干細(xì)胞基因操作實(shí)驗(yàn)的理想選擇
產(chǎn)品名稱:人 iPS細(xì)胞基因編輯和單細(xì)胞克隆系統(tǒng)
產(chǎn)品貨號(hào):CellArtis Y30021
產(chǎn)品品牌:TAKARA/ CellArtis
英文名稱:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
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品牌 貨號(hào) 名稱
CellArtis Y40002 NDiff® 227
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人 iPS細(xì)胞基因編輯和單細(xì)胞克隆系統(tǒng) 現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎咨詢
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