產(chǎn)地 | 國內 |
品牌 | Biosharp |
貨號 | BL623A |
用途 | 壁細胞和懸浮細胞(哺乳動(dòng)物細胞系)的轉染 |
英文名稱(chēng) | Lip2000Transfection Reagent |
純度 | % |
別名 | 轉染試劑 |
規格 | 0.5 ml |
是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品名稱(chēng):Biosharp BL623A 脂質(zhì)體2000/Lip2000轉染試劑
產(chǎn)品貨號:BL623A
產(chǎn)品品牌:Biosharp
產(chǎn)品產(chǎn)地:國內
產(chǎn)品規格:0.5 ml
用途范圍:壁細胞和懸浮細胞(哺乳動(dòng)物細胞系)的轉染
英文名稱(chēng):Lip2000Transfection Reagent
保存條件:2-4℃保存一年(避免冷凍)。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Lip2000是一種新型的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉染試劑,適合于將核酸(DNA和RNA)轉染至真核細胞,具有低細胞毒性、對多種類(lèi)型的細胞都具有高轉染效率、轉染時(shí)血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點(diǎn)。
質(zhì)粒DNA的轉染:
對大多數細胞來(lái)說(shuō),DNA(μg)與Lip2000(μl)的比例為1:2~1:3。轉染時(shí)高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。
使用說(shuō)明:(以 24 孔板為例)
1、細胞鋪板:
貼壁細胞:轉染前一天,用500μl不含抗生素的培養基接種0.5-2×105 細胞,使之 天能達到 70-90%匯合。
懸浮細胞:在準備 DNA-Lip2000 復合物之前,用500μl不含抗生素的培養基接種4-8×105細胞即可。
2、對每個(gè)轉染樣品,進(jìn)行以下操作
(1)在離心管里分別加入50μl無(wú)血清培養基(如OPTI-MEM Ⅰ 培養基)和 0.8μg DNA,輕柔混勻,制成DNA稀釋液。
(2)在另一個(gè)離心管里分別加入50μl無(wú)血清培養基(如OPTI-MEM Ⅰ 培養基)和2.0μl Lip2000(注意用前先混勻),輕柔混勻,制成 Lip2000稀釋液,室溫靜置 5 分鐘。
(3)將 DNA 稀釋液和 Lip2000 稀釋液混合,輕柔混勻,室溫靜置 20分鐘,形成DNA-Lip2000 復合物。DNA-Lip2000 復合物在室溫下可穩定存在 6 小時(shí)。
3、將 DNA-Lip2000 復合物加入到接種好的細胞中,將培養板輕輕地前后搖動(dòng),使復合物分散均勻。
4、在 37℃CO2 培養箱中培養 4-6 小時(shí)后更換培養基,繼續培養18-48 小時(shí)
5、如果要篩選穩定細胞株,則在轉染24小時(shí)后將細胞按照1:10 或更高的比例接種到新鮮培養基中, 天加入選擇性培養基進(jìn)行篩選。
質(zhì)粒 DNA 轉染的優(yōu)化:
為達到 的轉染效率和降低細胞毒性的影響,可以對 DNA 和 Lip2000 的比例以及細胞密度進(jìn)行優(yōu)化,一般在1:0.5~1:5 的范圍內優(yōu)化DNA (μg) 和 Lip2000 (μl) 的比例。
產(chǎn)品名稱(chēng):Biosharp BL623A 脂質(zhì)體2000/Lip2000轉染試劑
產(chǎn)品貨號:BL623A
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