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| 產(chǎn)地 | 美國(guó) |
| 品牌 | zymo |
| 貨號(hào) | D5024 |
| 用途 | DNA的完全異硫化 |
| 包裝規(guī)格 | 50 Rxns. |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品亮點(diǎn)：
雙硫酸鹽轉(zhuǎn)化的完整解決方案。該一體套件包含用于雙硫酸鹽轉(zhuǎn)化DNA的試劑，無(wú)需純化，甲基化人類DNA與控制底轉(zhuǎn)，以及一個(gè)強(qiáng)大的熱啟動(dòng)PCR聚合酶，專門配制為雙硫酸鹽轉(zhuǎn)化DNA。
專為*需要整合產(chǎn)品以控制雙硫化轉(zhuǎn)化的用戶而設(shè)計(jì)。
試劑盒包括：一個(gè)EZDNA甲基化-直接試劑盒，一個(gè)完全甲基化通用甲基化人類DNA標(biāo)準(zhǔn)，和ZymoTaqDNA聚合酶。
EZ DNA甲基化-啟動(dòng)套件為DNA的完全異硫化轉(zhuǎn)化提供了必要的工具，用于甲基化分析。該試劑盒包括允許純化DNA和DNA直接從血液、細(xì)胞和新鮮或FFPE組織轉(zhuǎn)化的試劑，而不受上游DNA純化的先決條件。全甲基化通用甲基化人類DNA標(biāo)準(zhǔn)為PCR提供了一套特殊的底轉(zhuǎn)，用于評(píng)估轉(zhuǎn)化效率。*，包括一種獨(dú)特的ZymoTaq DNA聚合酶，用于雙硫化處理DNA的強(qiáng)擴(kuò)。
適用于 | 回收的DNA是下游分析的理想的選擇，包括PCR、內(nèi)核糖酶消化、測(cè)序、微陣列等。 |
應(yīng)用 | 純化、轉(zhuǎn)化的DNA具有高質(zhì)量，非常適合下游工藝，包括下一代測(cè)序、PCR擴(kuò)增等的庫(kù)準(zhǔn)備。 |
轉(zhuǎn)換 | > 99.5% |
洗脫體積 | ≥ 10 μl |
設(shè)備 | 帶加熱蓋和微離心的熱循環(huán)器。 |
輸入 | 含有50皮克至2μgDNA的樣品。為了獲得*結(jié)果，輸入DNA的量應(yīng)在200至500納克。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)治療的細(xì)胞數(shù)量范圍為 10-105細(xì)胞。 |
處理時(shí)間 | 4 小時(shí) |
恢復(fù) | > 80% |
示例源 | 血液、組織、細(xì)胞、FFPE、LCM衍生樣品、純化基因組DNA、內(nèi)核糖核酸消化DNA、線性質(zhì)粒DNA等。 |
轉(zhuǎn)換效率低和低產(chǎn)量可能是由于各種不同的實(shí)驗(yàn)特定條件。請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持部門，討論您的特定實(shí)驗(yàn)條件，并與產(chǎn)品*進(jìn)一步排除故障。
在基因組DNA的二乙基纖維處理后，非甲基化細(xì)胞氨酸殘留物被轉(zhuǎn)化為烏拉西爾。恢復(fù)的DNA通常為 A、U 和 T 富。原始基座配對(duì)不再存在。相反，它是單絞合與有限的非特定基配對(duì)在室溫下。260 nm 的吸收系數(shù)與RNA相似。在確定回收的二硫化處理DNA的濃度時(shí)，對(duì)Ab260 = 1.0使用值為40μg/ml。要可視化，在阿加羅斯凝膠上運(yùn)行轉(zhuǎn)換后的 DNA，然后在冰上冷卻凝膠 30 分鐘。預(yù)期的涂片將在100-1500bp之間。
> 50 bp.
轉(zhuǎn)化的DNA應(yīng)在M-洗脫緩沖液中洗脫，以保持轉(zhuǎn)化后的DNA長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存。如果正確存儲(chǔ)長(zhǎng)期 （<-20C），樣品應(yīng)持續(xù)一個(gè)月。盡量減少凍結(jié)/解凍，以保持雙硫纖維轉(zhuǎn)化的DNA穩(wěn)定。
無(wú)論背景*，Bisulfite 轉(zhuǎn)化都有效，因此該試劑盒與來自植物和其他非 CpG 甲基化水平高的物種的基因組 DNA 兼容。
將脫硫緩沖器留在列上的時(shí)間比建議的要長(zhǎng)，將導(dǎo)致更多的降解，進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)量降低。
ZymoTaq DNA聚合酶專為雙硫酸鹽擴(kuò)增反應(yīng)而設(shè)計(jì)。ZymoTaq 可作為獨(dú)立聚合酶 （E2001/E2002）、預(yù)混合 （E2003/E2004） 和 qPCR 預(yù)混合 （E2054/E2055） 提供。
Cat # | Name | Size |
E2003 | ZymoTaq PreMix | (50 Rxns.) (2 x 625 μl) |
D5020 | EZ DNA Methylation-Direct Kit | 50 Rxns. |
D5011 | Universal Methylated Human DNA Standard | Human |
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