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基因組 DNA分離 用于 qPCR 的 DNA 試劑盒

產(chǎn)品名稱：DNA Extraction Kit      產(chǎn)品貨號：200600

RUO

RecoverEase DNA 分離試劑盒在不使用有毒有機(jī)溶劑提取或乙醇沉淀的情況下，從多種全組織（肝、脾、腎、腦、睪丸）中快速分離并回收高分子量（100 至 500 kb）基因組 DNA。


回收的基因組 DNA 完全水合，*天即可用于多種實驗應(yīng)用，包括 Southern 印跡分析、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR)、脈沖場電泳分析，以及從轉(zhuǎn)基因動物中回收 Lambda 穿梭載體。

僅限研究使用。不可用于診斷目的。

特性

·         從整個組織中分離出高分子量基因組 DNA

·         轉(zhuǎn)基因突變分析中 DNA 分離的理想選擇

·         無需有機(jī)溶劑提取或乙醇沉淀

·         回收的 DNA 在*天即可使用

·         從 Big Blue 小鼠和其他轉(zhuǎn)基因小鼠中有效回收轉(zhuǎn)基因穿梭載體

·         快速可靠地從全血和各種來源中分離高分子量基因組 DNA

·         從 1 μL 至 5 mL 全血樣本中獲得可進(jìn)行 PCR 的基因組 DNA

·         用鹽析步驟分離蛋白質(zhì)，然后用乙醇沉淀 DNA，在所選緩沖液中重新懸浮

工作原理
快速分離高分子量基因組 DNA

RecoverEase DNA 分離試劑盒可在不使用有機(jī)溶劑提取或乙醇沉淀的情況下，從多種組織中快速分離高分子量基因組 DNA。該過程涉及組織的物理分解、粗過濾和通過短時離心分離細(xì)胞核。然后與含有蛋白酶 K 的高活性蛋白酶溶液一起溫育以對細(xì)胞蛋白質(zhì)進(jìn)行預(yù)酶解。

獲得可立即使用的 DNA

當(dāng) DNA 制備物轉(zhuǎn)移到方便、自由浮動的透析杯中時，酶解繼續(xù)進(jìn)行，可利用所述透析杯將酶解肽通過半透膜過夜透析。透析后，從透析杯中收集完全水合的純化高分子量 DNA。得到的 DNA 長度測定結(jié)果均為 100 至 500 kb，可立即用于實驗應(yīng)用，包括 Southern 印跡分析、PCR、脈沖場電泳分析或從轉(zhuǎn)基因動物回收 λ 穿梭載體。

RecoverEase 方法與苯酚-氯仿 DNA 分離方法

RecoverEase 方法僅需 17 小時。該 DNA 分離試劑盒的優(yōu)點(diǎn)在于可以在早期去除細(xì)胞胞質(zhì)中的核酸酶，消除有毒的有機(jī)溶劑（例如苯酚和氯仿），以及減少 DNA 提取和過量處理相關(guān)的剪切力。DNA 完全水合，可在透析后立即使用。膀胱和皮膚等某些組織不適合進(jìn)行均質(zhì)化或細(xì)胞核分離，因此不推薦將它們作為用該分離試劑盒進(jìn)行基因組 DNA 分離的起始材料。

快速參考協(xié)議

DNA提取試劑盒全血

步驟過程時間

1-3洗滌濃縮細(xì)胞25分鐘

4-7裂解細(xì)胞75分鐘

8-10從蛋白質(zhì)中提取核酸30分鐘

11-16純化DNA 30分鐘

整個組織

步驟過程時間

1-2組織均一化 10分鐘

3-5裂解細(xì)胞 2小時

6-9從蛋白質(zhì)中提取核酸30分鐘

10-12純化DNA 30分鐘

培養(yǎng)細(xì)胞

步驟步驟所需時間

1 -3濃縮細(xì)胞30分鐘

4-5洗滌細(xì)胞30分鐘

6-9裂解細(xì)胞1.5小時

10-13從蛋白質(zhì)中提取核酸30分鐘

14-16純化DNA 30分鐘

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