Cygnus F550CHO宿主細(xì)胞蛋白免疫檢測(cè)試劑盒V3

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產(chǎn)品英文名稱：CHO HCP ELISA kit, 3G
產(chǎn)品中文名稱：CHO HCP酶聯(lián)免疫分析試劑盒

CHO HCP ELISA 試劑盒 產(chǎn)品介紹：
CHO HCP是第三代ELISA試劑盒，比之前試劑盒具有更廣泛HCP反應(yīng)性。新型試劑盒在檢測(cè)CHO HCPs 蛋白方面有很多改進(jìn)。新試劑盒具有更高的靈敏度，在抗體物和其它CHO表達(dá)蛋白中檢測(cè)HCP蛋白可以精確到到十億分之一百。第三代ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)大 量藥物原料和中試樣品檢測(cè)評(píng)估，是工藝開發(fā)和大量釋放試驗(yàn)檢測(cè)的通用方法。抗體反應(yīng)性使用傳統(tǒng)2D 蛋白雜交技術(shù)（2D HPLC-ELISA）鑒定。2D HPLC-ELISA方法顯示抗體對(duì)超過(guò)750種HCPs都具有反應(yīng)性。用蛋白檢測(cè)方法和ELISA正交試驗(yàn)表明這些多達(dá)750種的宿主細(xì)胞蛋白意味著高 于98%的蛋白種類均可用ELISA方法檢測(cè)到。因此，這種抗體可以避免丟失任何重要的HCP蛋白。

產(chǎn)品使用時(shí)一定要做好保護(hù)措施：0.5M硫磺酸有強(qiáng)腐蝕性，要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測(cè)前所有試劑都要平衡到室溫。

§檢測(cè)原理：CHO檢測(cè) 是一個(gè)雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測(cè)。樣本中包含的CHO HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-CHO抗體的辣根過(guò)氧化物酶同時(shí)反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-CHO蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反應(yīng)構(gòu)成為夾層 式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測(cè)定水解物濃度，水解物 濃度與CHO HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出CHO HCPs蛋白含量。

§檢測(cè)過(guò)程：取出所有試 劑平衡到室溫→移取100μl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分別移取50μl標(biāo)準(zhǔn)液，對(duì)照物和樣品至待測(cè)孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時(shí)，180rpm→清空小 孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)

§結(jié)果分析：標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測(cè)定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線，例如點(diǎn)到點(diǎn)，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會(huì)出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標(biāo)注吸光值，X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。（操作時(shí)每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要重復(fù)滴定到兩個(gè)小孔中，以便計(jì)算平均分光光度值，樣品也需計(jì)算平均吸光值）。

CHO HCP ELISA組成成份：
● Anti-CHO:HRP(辣根過(guò)氧化物酶)　  　　　      1x12mL   F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板　          　　　               12x8孔　  F552
● CHO HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)    1mL/瓶　 F553
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸)  　　　      1x12mL　 F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)　                      1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)　            1x50mL   F004

需自備物：
? 微量板分光光度計(jì)，雙波長(zhǎng)450 & 650nm
? 移液器-50L and 100L
? 可重復(fù)使用或多通道移液器-100L
? 微量板搖床（150 - 200 rpm）
? 樣品稀釋液（推薦使用Cat # I028）
? 1L清洗瓶
? 蒸餾水

美國(guó)Cygnus公司提供的ELISA試劑盒產(chǎn)品主要包括以下兩類：

Host Cell Protein Analysis ELISA Kits（宿主細(xì)胞蛋白分析ELISA試劑盒）

其來(lái)源種屬有：哺乳動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞。

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