產(chǎn)地 | 美國 |
品牌 | SEROCHEM |
貨號 | PRIME-P100-1G |
用途 | 細胞轉(zhuǎn)染 |
包裝規(guī)格 | 1g |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
PEI 轉(zhuǎn)染試劑 現(xiàn)貨促銷 還可以免費試用,趕緊致電申請吧!
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產(chǎn)品名稱:PEI Prime™? Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine
產(chǎn)品貨號:PRIME-P100-1G
產(chǎn)品描述:PEI PrimeTM是一款高性能轉(zhuǎn)染試劑,專為大量,低成本和可擴展的瞬態(tài)基因表達。PEl是最常用的HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。PE Prime TM是在哺乳動物表達系統(tǒng)中生產(chǎn)重組蛋白、抗體和病毒的*試劑。PEI Prime TM粉末是一種極細的,快速溶解的鹽酸鹽。這節(jié)省了數(shù)小時的操作時間,并將試劑準備過程中的錯誤風險降到*。
病毒具有天然嗜性﹐能夠自然感染細胞,將它們攜帶的基因轉(zhuǎn)移到宿主細胞中,因此轉(zhuǎn)導(dǎo)效率比較高,目前基因療法中很多都使用了病毒載體,并已進入臨床試驗階段。現(xiàn)使用的病毒主要有逆轉(zhuǎn)錄病毒﹑腺病毒、腺相關(guān)病毒等。非病毒基因載體在基因轉(zhuǎn)染與表達的效率上沒有病毒載體高,但他們具有獨特的優(yōu)勢,如低毒性、低免疫原性﹑無傳染性﹑合成制備方便、結(jié)構(gòu)靈活可控,已經(jīng)得到研究者的廣泛應(yīng)用,其中陽離子聚合物是最主要的且研究最廣泛的非病毒基因載體之一。
陽離子聚合物--聚乙烯亞胺(polyethyleminine,PEI)
聚乙烯亞胺是目前研究最廣泛的陽離子聚合物非病毒基因載體,它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團的水溶性聚合物。PEI單體中每3個原子含1個氮,并構(gòu)成同的胺基。這些胺基的pKa值不同,使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強的結(jié)合DNA和黏附細胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。
分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,但因為其大量正電荷的存在以及非生物降解性,可以導(dǎo)致細胞膜去穩(wěn)定化,顯示出較大的細胞毒性,低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四種細胞上評價交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率。
不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同
枝狀的 800 kD PEI 是*報道的可用于多種細胞轉(zhuǎn)染的試劑,枝狀的 25 kD PEI(25B)用于HEK293 細胞大規(guī)模瞬時轉(zhuǎn)染,其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD、600 kD、800 kD 或線狀 22 kD PEI(22L)的高。
有研究報道,比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro,轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細胞,PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,PEI pro 的毒性*。經(jīng)過優(yōu)化,PEI-Max 的表達量優(yōu)于 25 kD LPEI。
PEI 介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3(W/W),提高轉(zhuǎn)染試劑比例會提高轉(zhuǎn)染效率,但是隨之細胞毒性也會增加。另外轉(zhuǎn)染時的細胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會影響轉(zhuǎn)染效果。
陽離子聚合物--脂質(zhì)體
陽離子脂質(zhì)體易穿透細胞膜,轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑,因而也廣泛用于瞬時轉(zhuǎn)染,但因其化學(xué)合成不易,商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價格較高,遠貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,因此只適合于小量瞬時轉(zhuǎn)染。
目前最常用的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合,以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。HEK293 細胞是非常適合進行瞬時轉(zhuǎn)染的細胞,很容易接收外來 DNA,在合適的轉(zhuǎn)染條件下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達 80% 以上, 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達90% 以上。但是傳統(tǒng)的 CHO 細胞的轉(zhuǎn)染效率相對較低,只有 40% ~ 60%。
Thermo Fisher 公司新開發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達量有了較大的提升,但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價格較貴,不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大。
因此,目前PEI轉(zhuǎn)染試劑,價格實惠深受廣大科研伙伴的熱愛。重點是超級便宜?。?!便宜到*程度呢?偷偷告訴你:據(jù)說一次可配1L的量!1L??天啊,*能用的完?如此便宜實惠的轉(zhuǎn)染試劑該*操作呢?
目前,小編給大家謀福利了,“免費試用PEI轉(zhuǎn)染試劑”活動??!
品牌 | 貨號 | 規(guī)格 |
SEROCHEM | PRIME-P100-1G | 1g |
SEROCHEM | PRIME-P100-100MG | 100mg |
SEROCHEM | Prime-AQ100-100ML | 100ml |
SEROCHEM | Prime-AQ100-5ML | 5ml |
活動內(nèi)容:客戶可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑免費試用,單個研究組僅限申請1 瓶,數(shù)量不多,先到先得!
活動對象:所有終端
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