為確保細胞在凍存過(guò)程中保持活力,正確使用DMSO凍存液至關(guān)重要。以下是關(guān)于如何正確使用DMSO凍存液的指南:
1. 選擇合適的細胞:選擇對數生長(cháng)期、生長(cháng)狀態(tài)良好的細胞進(jìn)行凍存。
2. 準備凍存液:配制含10%DMSO(可根據細胞類(lèi)型調整至5-12%)和適當比例的基礎培養基或血清的凍存液。確保凍存液新鮮配置或保存得當。
3. 清洗細胞:用PBS清洗細胞,去除殘留的培養基和血清。
4. 收集并懸浮細胞:通過(guò)離心收集細胞,并用凍存液輕輕懸浮細胞,確保細胞均勻分布。
5. 分裝與標記:將細胞懸液分裝至凍存管中,每管1~1.5ml,并標記細胞的名稱(chēng)、日期和操作者。
6. 控制降溫速率:將凍存管放入冷凍器中,逐漸降低溫度至-80°C或更低,降溫速率控制在-1~-2°C/min。在-25°C以下時(shí),可增至-5~-10°C/min。
7. 長(cháng)期儲存:細胞到達-80°C或更低溫度后,可移至液氮容器中長(cháng)期保存。
遵循以上指南,可以確保細胞在凍存過(guò)程中保持活力,為后續的細胞實(shí)驗提供優(yōu)質(zhì)的細胞來(lái)源。